Hvilken er den beste metoden?
—Tester for SARS-CoV-2-infeksjonsdiagnose
For bekreftede tilfeller av covid-19, rapporterte de vanlige kliniske symptomene feber, hoste, myalgi eller tretthet.Likevel er ikke disse symptomene unike trekk ved COVID-19 fordi disse symptomene ligner på andre virusinfiserte sykdommer som influensa.For tiden er virusnukleinsyre sanntids-PCR (rt-PCR), CT-avbildning og noen hematologiske parametere de primære verktøyene for klinisk diagnose av infeksjonen.Mange laboratorietestsett er utviklet og brukt til å teste pasientprøver for COVID-19 av kinesisk CDC1, US CDC2og andre private selskaper.IgG/IgM antistofftest, en serologisk testmetode, er også lagt til som et diagnostisk kriterium i Kinas oppdaterte versjon av diagnose- og behandlingsretningslinjene for den nye koronavirussykdommen (COVID-19), som ble utgitt 3. mars.1.Virusnukleinsyre rt-PCR-testen er fortsatt den gjeldende standard diagnostiske metoden for diagnose av COVID-19.
StrongStep®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (deteksjon for tre gener)
Likevel lider disse sanntids PCR-testsettene, som leter etter genetisk materiale fra viruset, for eksempel i nasale, orale eller anale vattpinner, av mange begrensninger:
1) Disse testene har lange behandlingstider og er kompliserte i drift;det tar vanligvis i gjennomsnitt over 2 til 3 timer å generere resultater.
2) PCR-testene krever sertifiserte laboratorier, dyrt utstyr og utdannede teknikere for å operere.
3) Det er noen antall falske negativer for rt-PCR av COVID-19.Det kan skyldes lav SARS-CoV-2-viral belastning i vattpinneprøven i øvre luftveier (Nytt koronavirus infiserer hovedsakelig de nedre luftveiene, slik som lungealveoler) og testen kan ikke identifisere personer som gikk gjennom en infeksjon, ble friske, og fjernet viruset fra kroppene deres.
Forskning av Lirong Zou et al4fant at høyere viral belastning ble oppdaget kort tid etter symptomdebut, med høyere viral belastning oppdaget i nesen enn i halsen, og det virale nukleinsyreutslippet til pasienter infisert med SARS-CoV-2 ligner det for pasienter med influensa4og virker annerledes enn det man ser hos pasienter infisert med SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5undersøkte serieprøver (halsprøver, sputum, urin og avføring) fra to pasienter i Beijing og fant at virusmengden i strupeprøver og sputumprøver nådde en topp rundt 5–6 dager etter symptomdebut, sputumprøver viste generelt høyere virusmengde enn svelgprøver.Det ble ikke påvist viralt RNA i urin- eller avføringsprøver fra disse to pasientene.
PCR-test gir bare positivt resultat når viruset fortsatt er tilstede.Testene kan ikke identifisere personer som gikk gjennom en infeksjon, ble friske og fjernet viruset fra kroppen.I praksis var bare rundt 30% -50% positive for PCR hos pasienter med klinisk diagnostisert ny koronavirus-lungebetennelse.Mange nye pasienter med koronavirus-lungebetennelse kan ikke diagnostiseres på grunn av negativ nukleinsyretest, så de kan ikke få den tilsvarende behandlingen i tide.Fra den første til den sjette utgaven av retningslinjene, basert utelukkende på diagnosen av nukleinsyretestresultater, som forårsaket store problemer for klinikere. Den tidligste "varsleren", Dr. Li Wenliang, øyelege ved Wuhan Central Sykehuset, er død.I løpet av livet hadde han tre nukleinsyretester ved feber og hoste, og sist gang fikk han PCR-positive resultater.
Etter diskusjon av eksperter ble det besluttet å øke serumtestmetodene som et nytt diagnostisk kriterium.Mens antistofftester, også kalt serologiske tester, kan bekrefte om noen ble smittet selv etter at immunsystemet deres har fjernet viruset som forårsaker COVID-19.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM antistoff hurtigtest
IgG/IgM antistofftest vil bidra til å spore på en mye mer populasjonsbasert måte hvem som har hatt infeksjonen, fordi mange tilfeller ser ut til å være spredt fra asymptomatiske pasienter som ikke lett kan identifiseres.Et par i Singapore, mannen testet positivt ved PCR, hans kones PCR-testresultat var negativt, men antistofftestresultatene viste at hun hadde antistoffer, det samme hadde mannen hennes.
Serologiske analyser må valideres nøye for å være sikker på at de reagerer pålitelig, men bare på antistoffer mot det nye viruset.En bekymring var at likheten mellom virusene som forårsaker alvorlig akutt respiratorisk syndrom og COVID-19 kan føre til kryssreaktivitet.IgG-IgM utviklet av Xue Feng wang6ble ansett for å kunne brukes som en point-of-care test (POCT), da den kan utføres nær sengekanten med fingerstikkblod.Settet har sensitivitet på 88,66 % og spesifisitet på 90,63 %.Imidlertid var det fortsatt falske positive og falske negative resultater.
I Kinas oppdaterte versjon av diagnose- og behandlingsretningslinjen for den nye koronavirussykdommen (COVID-19)1, er bekreftede tilfeller definert som mistenkte tilfeller som oppfyller ett av følgende kriterier:
(1) Luftveisprøver, blod- eller avføringsprøver testet positive for SARS-CoV-2-nukleinsyre ved bruk av rt-PCR;
(2)Genetisk sekvensering av virus fra luftveis-, blod- eller avføringsprøver er svært homolog med den kjente SARS-CoV-2;
(3)Serum nytt koronavirusspesifikke IgM-antistoff og IgG-antistoff var positive;
(4)Serum nytt koronavirus-spesifikt IgG-antistoff endret fra negativt til positivt eller koronavirus-spesifikt IgG-antistoff under restitusjonsperioden er 4 ganger høyere enn i den akutte perioden.
Diagnose og behandling av COVID-19
| Retningslinjer | Publisert | Bekreftede diagnostiske kriterier |
| Versjon 7 | 3. mars 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versjon 6 | 18. februar 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referanse
1. Retningslinjer for diagnose og behandling av ny koronavirus-lungebetennelse (prøveversjon 7, National Health Commission of the People's Republic of China, utstedt 3. mars 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Forskningsbruk bare sanntids RT-PCR-protokoll for identifisering av 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapore hevder første bruk av antistofftest for å spore koronavirusinfeksjoner
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.SARS-CoV-2 viral belastning i prøver fra øvre luftveier fra infiserte pasienter 19. februar 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Viralbelastninger av SARS-CoV-2 i kliniske prøver Lancet Infect Dis 2020 Publisert online 24. februar 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Utvikling og klinisk anvendelse av en rask IgM-IgG kombinert antistofftest for SARS-CoV-2
Infeksjonsdiagnose XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Innleggstid: 17. mars 2020
