En verden en kamp
─ Internasjonalt samarbeid for å bygge et globalt samfunn med felles skjebne som reagerer på Covid-19 pandemisk utfordring
Roman Coronavirus som feier over hele verden har resultert i en pågående global Covid-19 pandemisk krise. Roman Coronavirus har ingen grenser, ingen land vil bli spart fra dette slaget mot Covid-19. Som svar på denne verdensomspennende Covid-19-pandemien, gir Liming Bio-Products Corp bidrag for å støtte våre globale samfunns velvære.
Vår verden står for tiden overfor den enestående virkningen av den nye Coronavirus Disease 2019 (Covid-19) pandemien. Til dags dato er det ikke noe effektivt medikament tilgjengelig for behandling av denne sykdommen. Imidlertid er mange diagnostiske tester utviklet for påvisning av COVID-19. Disse testene er basert på molekylære eller serologiske metoder for å oppdage den nye koronavirus -spesifikke nukleinsyre eller antistoffbiomarkører. Ettersom Covid-19 har nådd en pandemisk status, er tidlig diagnose av den nye koronavirusinfeksjonen kritisk for å vurdere spredningen av viruset og inneholde den, men en perfekt test for universell bruk eksisterer ennå ikke. Vi må vite hvilke tester som potensielt kan brukes til screening, diagnose og overvåking av Covid-19-infeksjonen, og hva er deres begrensninger. Det er veldig viktig hvordan man kan utnytte disse vitenskapelige verktøyene bedre og å identifisere og kontrollere fremveksten av denne raskt spredte og alvorlige sykdommen.
Hensikten med påvisning av det nye koronavirus er å avgjøre om et individ som har Covid-19-infeksjon eller en asymptotisk bærer som kan spre viruset lydløst, for å gi viktig informasjon for å veilede beslutninger for klinisk behandling. Tidligere studier har vist at 70% av kliniske beslutninger avhenger av testresultatene. Når forskjellige deteksjonsmetoder brukes, er også kravene til deteksjonsreagenssettet forskjellige.
Figur 1
Figur1:Diagram som viser nøkkelstadiene i generelle biomarkørnivåer i det typiske tidsforløpet for Covid-19-infeksjon. X-aksen indikerer antall infeksjonsdager, og Y-aksen indikerer den virale belastningen, konsentrasjonen av antigener og konsentrasjon av antistoffer i forskjellige perioder. Antistoff refererer til IgM- og IgG -antistoffer. Både RT-PCR og antigendeteksjon brukes til å oppdage tilstedeværelsen eller fraværet av nye koronavirus, som er direkte bevis for tidlig pasientdeteksjon. I løpet av en uke med virusinfeksjon er PCR -deteksjon eller antigendeteksjon foretrukket. Etter den nye koronavirusinfeksjonen i omtrent 7 dager, har IgM -antistoffet mot det nye koronavirus gradvis økt i pasientens blod, men varigheten av eksistensen er kort, og konsentrasjonen avtar raskt. I kontrast vises IgG -antistoffet mot viruset senere, vanligvis omtrent 14 dager etter virusinfeksjonen. IgG -konsentrasjonen øker gradvis, og den vedvarer en lang periode i blodet. Så hvis IgM blir oppdaget i pasientens blod, betyr det at viruset nylig har smittet, som er en tidlig infeksjonsmarkør. Når IgG -antistoffet oppdages i pasientens blod, betyr det at virusinfeksjonen har vært i noen tid. Det kalles også sen infeksjon eller tidligere infeksjon. Det sees ofte hos pasienter som er i restitusjonsfasen.
Biomarkørene for roman Coronavirus
Den nye koronavirus er et RNA -virus, som er sammensatt av proteiner og nukleinsyrer. Viruset invaderer verten (menneskelig) kropp, kommer inn i celler gjennom bindingssted som tilsvarer reseptor ACE2, og replikerer i vertsceller, noe som får det menneskelige immunforsvaret til å reagere på utenlandske inntrengerne og produsere spesifikke antistoffer. Derfor kan hetteglassnukleinsyrene og antigenene, og spesifikke antistoffer mot nye koronavirus teoretisk brukes som spesifikke biomarkører for påvisning av det nye koronavirus. For nukleinsyredeteksjon er RT-PCR-teknologi de mest brukte, mens serologiske metoder ofte brukes for påvisning av de nye koronaviruspesifikke antistoffene. For øyeblikket er det en rekke testmetoder tilgjengelig som vi kan velge for å teste Covid-19-infeksjon [1].
Grunnleggende prinsipper for hovedtestmetoder for ny koronavirus
Mange diagnostiske tester for COVID_19 er tilgjengelige så langt, med flere testsett som får godkjenning under en autorisasjon for nødbruksautorisasjon hver dag. Selv om den nye testutviklingen kommer ut med så mange forskjellige navn og formater, er alle de nåværende COVID_19-testene i utgangspunktet avhengige av to hovedteknologier: nukleinsyredeteksjon for det virale RNA og serologiske immunoanalyser som oppdager viralspesifikke antistoffer (IgM og IgG).
01. Nukleinsyredeteksjon
Omvendt transkripsjonspolymerasekjedereaksjon (RT-PCR), sløyfemediert isotermisk amplifisering (LAMP) og neste generasjons sekvensering (NGS) er de vanlige nukleinsyremetodene for påvisning av ny koronavirus RNA. RT-PCR er den første typen test for Covid-19, anbefalt av både Verdens helseorganisasjon (WHO) og US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02.Serologisk antistoffdeteksjon
Antistoff er et beskyttende protein produsert i menneskekroppen som respons på virusinfeksjonen. IgM er en tidlig type antistoff, mens IgG er et senere type antistoff. Serumet eller plasmaprøven blir vanligvis undersøkt for tilstedeværelse av spesifikke IgM- og IgG-typer av antistoffet for vurdering av akutte og rekonvaleserende faser av Covid-19-infeksjon. Disse antistoffbaserte deteksjonsmetodene inkluderer kolloidal gullimmunokromatografianalyse, latex eller fluorescerende mikrosfære immunokromatografi, enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA) og kjemiluminescensanalyse.
03.Viral antigendeteksjon
Antigen er en struktur på viruset som gjenkjennes av menneskekroppen som utløser immunforsvarssystemet for å produsere antistoffer for å fjerne viruset fra blod og vev. Et viralt antigen som er til stede på viruset kan målrettes og oppdages ved bruk av immunoanalyse. I likhet med viralt RNA er virale antigener også til stede i luftveiene til infiserte individer og kan brukes til å diagnostisere akuttfase av Covid-19-infeksjonen. Derfor anbefales det ofte å samle øvre respirasjonsprøver som spytt, nasofaryngeal og orofaryngeale vattpinner, dyp hoste sputum, bronkoalveolar skyllingsvæske (BALF) for innledende antigen -testing.
Valg av testmetoder for ny koronavirus
Å velge en testmetode involverer mange faktorer, inkludert klinisk setting, testing av kvalitetskontroll, behandlingstid, testkostnader, sampling av innsamlingsmetoder, tekniske krav til laboratoriepersonell, krav til anlegg og utstyr. Påvisning av nukleinsyrer eller virale antigener er å gi direkte bevis på tilstedeværelsen av virusene og bekrefte diagnosen ny koronavirusinfeksjon. Selv om det er mange metoder for antigendeteksjon, er deres deteksjonsfølsomhet for det nye koronavirus teoretisk lavere enn for RT-PCR-amplifiseringen. Antistofftesting er påvisning av antivirusantistoffer produsert i menneskekroppen, som henger i tid og ofte ikke kan brukes til tidlig påvisning under den akutte fasen av virusinfeksjon. Den kliniske innstillingen for deteksjonsapplikasjoner kan variere, og eksemplaresamlingssidene kan også være forskjellige. For påvisning av virale nukleinsyrer og antigener, må prøven samles i luftveiene der viruset er til stede, for eksempel nasopharyngeale vattpinner, orofaryngeale vattpinner, sputum eller bronchoalveolar lavage fluid (BALF). For antistoffbasert påvisning må blodprøve samles og undersøkes for tilstedeværelse av spesifikt antivirusantistoff (IgM/IgG). Imidlertid kan antistoff- og nukleinsyretestresultater utfylle hverandre. For eksempel, når testresultatet er det nukleinsyre-negative, IgM-negative, men IgG-positive, indikerer disse resultatene at pasienten for øyeblikket ikke bærer viruset, men har blitt utvunnet fra den nye coronavirus-infeksjonen. [2]
Fordeler og ulemper med nye koronavirus -tester
I diagnose- og behandlingsprotokollen for ny koronavirus lungebetennelse (prøveversjon7) (utgitt av National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine 3. mars 2020) brukes nukleinsyretesting som gullstandardmetoden for diagnosen romanen Koronavirusinfeksjon, mens antistofftesting også anses som en av bekreftelsesmetodene for diagnosen.
Patogene og serologiske funn
(1) Patogene funn: Novle koronavirus-nukleinsyre kan påvises i nasofaryngeale vattpinner, sputum, nedre luftveis sekresjon, blod, avføring og andre prøver ved bruk av RT-PCRAND/eller NGS-metoder. Det er mer nøyaktig hvis prøver oppnås fra nedre luftveisveier (sputum eller luftkanalekstraksjon). Eksemplene skal sendes inn for testing så snart som mulig etter innsamling.
(2) Serologiske funn: NCP-virusspesifikk IgM blir påviselig rundt 3-5 dager etter begynnelsen; IgG når en titrering av minst 4 ganger økning under rekonvalesens sammenlignet med den akutte fasen.
Imidlertid avhenger valg av testmetoder av geografiske steder, medisinske forskrifter og kliniske omgivelser. I USA ga NIH Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) behandlingsretningslinjer (nettsted oppdatert: 21. april 2020) og FDA utstedte policy for diagnostiske tester for Coronavirus Disease-2019 under folkehelsetilsynet (utstedt 16. mars 2020 ), der serologisk testing av IgM/IgG -antistoffene bare valgt som en screeningtest.
Nukleinsyredeteksjonsmetode
RT_PCR er en svært følsom nukleinsyretest designet for å oppdage om det nye koronavirus -RNA er til stede i luftveiene eller andre eksemplarer. Et positivt PCR-testresultat betyr tilstedeværelsen av ny koronavirus RNA i prøven for å bekrefte Covid-19-infeksjonen. Et negativt PCR -testresultat betyr ikke fraværet av virusinfeksjonen fordi det kan påvirkes av dårlig prøvekvalitet eller sykdomstidspunkt i den gjenvunnede fasen osv. Selv om RT-PCR er en svært følsom test, har den flere ulemper. RT-PCR-tester kan være arbeidsintensive og tidkrevende, avgjørende avhengig av den høye kvaliteten på prøven. Dette kan være en utfordring fordi mengden viralt RNA ikke bare varierer enormt mellom forskjellige pasienter, men også kan variere innenfor samme pasient, avhengig av tidspunktene når prøven samles samt infeksjonsfasene eller begynnelsen av kliniske symptomer. Å oppdage det nye koronavirus krever prøver av høy kvalitet som inneholder en tilstrekkelig mengde intakt viralt RNA.
RT-PCR-testen kan gi et feil negativt resultat (falsk negativ) for noen pasienter som har Covid-19-infeksjon. Som vi vet, er de viktigste infeksjonsstedene til det nye koronavirus lokalisert ved lungen og den nedre luftveisanalen, for eksempel alveoler og bronkier. Derfor anses sputumprøven fra en dyp hoste eller den bronkoalveolære skyllingsvæsken (BALF) for å ha den høyeste følsomheten for virusdeteksjon. I klinisk praksis blir imidlertid prøver ofte samlet fra øvre luftveier ved å bruke nasofaryngeale eller orofaryngeale vattpinner. Å samle disse eksemplene er ikke bare ubehagelig for pasienter, men krever også spesialutdannet personell. For å gjøre prøvetaking mindre inngripende eller enklere, kan pasientene i noen tilfeller få en oral vattpinne og la dem ta en prøve fra bukkal slimhinne eller tunge som svinger seg selv. Uten tilstrekkelig viralt RNA kan RT-qPCR returnere et falsk-negativt testresultat. I Hubei-provinsen, Kina, ble RT-PCR-følsomhet i den innledende deteksjonen rapportert bare omtrent 30%-50%, med et gjennomsnitt på 40%. Den høye frekvensen av falsk-negativ var mest sannsynlig forårsaket av utilstrekkelig prøvetaking.
I tillegg krever RT-PCR-testen høyt trent personell for å utføre komplekse RNA-ekstraksjonstrinn og PCR-amplifiseringsprosedyre. Det krever også et høyere nivå av biosikkerhetsbeskyttelse, spesielt laboratorieanlegg og PCR-instrument i sanntid. I Kina må RT-PCR-testen for Covid-19 påvisning utføres i biosikkerhetsnivå 2-laboratorier (BSL-2), med personellbeskyttelse ved bruk av biosikkerhetsnivå 3 (BSL-3) praksis. I henhold til disse kravene, fra begynnelsen av januar til begynnelsen av februar 2020, var kapasiteten til Kina Wuhans CDC -laboratorium bare i stand til å oppdage noen hundre tilfeller per dag. Normalt ville dette ikke være noe problem når du tester andre smittsomme sykdommer. Når man arbeider med en global pandemi som Covid-19 med potensielt millioner av mennesker som skal testes, blir imidlertid RT-PCR et kritisk problem på grunn av kravene til spesielle laboratoriefasiliteter eller teknisk utstyr. Disse ulempene kan begrense RT-PCR til å brukes som et effektivt verktøy for screening, og kan også føre til forsinkelser i rapportene om testresultater.
Serologisk antistoffdeteksjonsmetode
Med fremdriften i sykdomsforløpet, spesielt i mellom- og sene stadier, er antistoffdeteksjonshastigheten veldig høy. En studie i Wuhan Central South Hospital viste at antistoffdeteksjonshastigheten kunne nå mer enn 90% i den tredje uken med Covid-19-infeksjon. Antistoffet er også produktet av den menneskelige immunresponsen mot det nye koronavirus. Antistofftesten gir flere fordeler i forhold til RT-PCR. For det første tester de serologiske antistoffene enkle og raske. Antistofflaterale strømningstester kan brukes til pleiepleie for å gi et resultat på 15 minutter. For det andre er målet detektert av den serologiske testen antistoffet, som er kjent for å være mye mer stabilt enn viralt RNA. Under innsamling, transport, lagring og testing er prøvene for antistofftester generelt mer stabile enn prøvene for RT-PCR. For det tredje, fordi antistoffet er jevnt fordelt i blodsirkulasjonen, er det mindre prøvetakingsvariasjon sammenlignet med nukleinsyretesten. Prøvevolumet som kreves for antistofftesten er relativt lite. For eksempel er 10 mikroliter av fingerprickeblod tilstrekkelig til bruk i antistoffet-lateral strømningstest.
Generelt blir antistofftesten valgt som et supplementverktøy for nukleinsyredeteksjon for å forbedre deteksjonshastigheten til det nye koronavirus under sykdomskursene. Når antistofftesten brukes sammen med en nukleinsyretest, kan det øke analysenøyaktigheten for diagnose av COVID19 ved å redusere potensielle falsk-positive og falsk-negative resultater. Den nåværende operasjonsguiden anbefaler ikke å bruke to typer test separat som et uavhengig deteksjonsformat, men bør brukes som et kombinert format. [2]
Figur2:Riktig tolkning av nukleinsyre og antistofftestresultater for påvisning av ny koronavirusinfeksjon
Figur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Roman Coronavirus IgM/IgG Antistoff Dual Rapid Test Kit (StrongStep®SARS-COV-2 IgM/IgG-antistoff Rask test, latex immunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Novel koronavirus (SARS-COV-2) multiplex sanntids PCR-sett (deteksjon for tre gener, fluorescerende sondemetode).
Note:Dette svært følsomme PCR-settet er tilgjengelig i lyofilisert format (frysetørkeprosess) for langvarig lagring. Settet kan transporteres og lagres ved romtemperatur og er stabilt i ett år. Hvert rør med forblanding inneholder alle reagensene som er nødvendige for PCR-amplifiseringen, inkludert omvendt-transkriptase, TAQ-polymerase, primere, sonder og DNTPS-underlag. Brukere kan ganske enkelt rekonstitutt blandingen ved å tilsette PCR-grade vann sammen med malen og deretter laste inn på et PCR -instrument for å kjøre forsterkningen.
Som svar på det nye koronavirusutbruddet, har Liming Bio-Products Co., Ltd. jobbet raskt for å utvikle to diagnostiske sett for å gjøre det mulig for kliniske og folkehelselaboratorier å raskt diagnostisere Covid-19-infeksjon. Disse settene er veldig egnet for bruk for storskala screening i land og regioner der det nye koronavirusutbruddet raskt sprer seg, og for å gi diagnose og bekreftelse for Covid-19-infeksjon. Disse settene er bare til bruk under forhåndsmetifisert autorisasjon for nødbruk (PEUA). Testing er begrenset til laboratorier som er sertifisert i henhold til forskriftene fra nasjonale eller lokale myndigheter.
Antigendeteksjonsmetode
1. Viral antigendeteksjon er klassifisert i samme kategori av direkte deteksjon som nukleinsyredeteksjon. Disse direkte deteksjonsmetodene ser etter bevis på virale patogener i prøven og kan brukes til bekreftelsesdiagnose. Imidlertid krever utvikling av antigendeteksjonssett høy kvalitet på monoklonale antistoffer med sterk affinitet og høy følsomhet som er i stand til å gjenkjenne og fange opp patogene virus. Det tar vanligvis mer enn seks måneder å velge og optimalisere et monoklonalt antistoff som er egnet for bruk i fremstilling av antigendeteksjonssettet.
2. Foreløpig er reagensene for direkte påvisning av det nye koronavirus fremdeles under forsknings- og utviklingsstadium. Derfor har ingen antigendeteksjonssett blitt klinisk validert og kommersielt tilgjengelig. Selv om det tidligere ble rapportert at et diagnostisk firma i Shenzhen har utviklet et antigendeteksjonssett og klinisk testet i Spania, kunne ikke analyse -påliteligheten og nøyaktigheten valideres på grunn av tilstedeværelsen av reagens kvalitetsproblemer. Til dags dato har NMPA (tidligere Kina FDA) ikke godkjent noe antigendeteksjonssett for klinisk bruk ennå. Avslutningsvis er det utviklet en rekke deteksjonsmetoder. Hver metode har sine fordeler og begrensninger. Resultatene fra forskjellige metoder kan brukes til verifisering og komplement.
3. Produserer et kvalitet Covid-19 testsett avhenger sterkt av optimalisering under forskning og utvikling. Liming Bio-Product Co., Ltd. Det kreves testsett for å oppfylle strenge standarder for produksjons- og kvalitetskontroll for å sikre at de gir de høyeste nivåene av ytelse og konsistens. Forskerne ved Liming Bio-Product Co., Ltd. har over tjue års erfaring med å designe, teste og optimalisere in vitro diagnostiske sett for å sikre det høyeste ytelsesnivået i analytisk kvantifisering.
Under Covid-19-pandemien sto den kinesiske regjeringen overfor bølgen av den enorme etterspørselen etter epidemiske forebyggende materialer i de internasjonale hotspots. 5. april, på pressekonferansen for State Council Joint Prevention and Control Mechanism ", styrker kvalitetsstyringen av medisinsk materiale og regulerer rekkefølgen på markedet", Jiang Fan, en inspektør på første nivå av utenrikshandel i departementet of Commerce, sa: "Deretter vil vi fokusere vår innsats på to aspekter, for det første for å fremskynde støtten fra mer medisinsk utstyr som det internasjonale samfunnet trenger, og også for å forbedre kvalitetskontroll, regulering og styring av produktene. Vi vil gi Kinas bidrag til i fellesskap å svare på den globale epidemien og bygge et samfunn med en delt fremtid for menneskeheten.
Figur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.s nye Coronavirus Reagent har oppnådd EU CE-registreringssertifikatet
Æresertifikatet
Houshenshan
Figur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. støttet Wuhan Vulcan (Houshenshan) Mountain Hospital for å kjempe mot Covid-19-epidemien og ble tildelt æresattesten til Wuhan Røde Kors. Wuhan Vulcan Mountain Hospital er det mest berømte sykehuset i Kina som spesialiserer seg på behandling av alvorlig covid - 19 pasienter.
Mens det nye Coronavirus-utbruddet fortsetter å spre seg rundt i verden, er Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. trappet opp for å støtte og hjelpe samfunn over hele verden med våre innovative teknologier for å bekjempe denne enestående globale trusselen. Rask testing av Covid-19-infeksjon er en kritisk del av å adressere denne trusselen. Vi fortsetter å bidra på en betydelig måte ved å tilby diagnostiske plattformer av høy kvalitet i hendene på frontlinjehelsearbeidere slik at folk kan motta de kritiske testresultatene de trenger. Liming Bio-Products Co., Ltd.s innsats i kampen mot Covid-19 Pandemic er å bidra med våre teknologier, erfaringer og kompetanse til internasjonale samfunn for bygging av et globalt skjebnefellesskap.
Lenge trykk ~ skann og følg oss
E -post: sales@limingbio.com
Nettsted: https://limingbio.com
Posttid: Mai-01-2020
