Én verden én kamp
─Internasjonalt samarbeid for å bygge et globalt fellesskap med felles skjebne som reagerer på COVID-19-pandemiutfordringen
Det nye koronaviruset som feier over hele verden har resultert i en pågående global COVID-19-pandemi-krise.Det nye koronaviruset har ingen grenser, ingen land vil bli spart fra denne kampen mot COVID-19.Som svar på denne verdensomspennende COVID-19-pandemien, gir Liming Bio-Products Corp bidrag for å støtte velværet til våre globale samfunn.
Vår verden står for øyeblikket overfor den enestående virkningen av den nye pandemien av coronavirus sykdom 2019 (COVID-19).Til dags dato er det ikke noe effektivt medikament tilgjengelig for behandling av denne sykdommen.Imidlertid er det utviklet mange diagnostiske tester for påvisning av COVID-19.Disse testene er basert på molekylære eller serologiske metoder for å oppdage de nye coronavirusspesifikke nukleinsyre- eller antistoffbiomarkørene.Ettersom COVID-19 har nådd en pandemistatus, er tidlig diagnose av den nye koronavirusinfeksjonen avgjørende for å vurdere spredningen av viruset og inneholde det, men en perfekt test for universell bruk eksisterer ennå ikke.Vi må vite hvilke tester som potensielt kan brukes til screening, diagnose og overvåking av COVID-19-infeksjonen, og hva er deres begrensninger.Det er svært viktig hvordan man kan utnytte disse vitenskapelige verktøyene bedre og hjelpe til med å identifisere og kontrollere fremveksten av denne raskt spredende og alvorlige sykdommen.
Formålet med påvisningen av det nye koronaviruset er å avgjøre om en person som har COVID-19-infeksjon eller en asymptotisk bærer som kan spre viruset stille, for å gi viktig informasjon for å veilede beslutningstaking for klinisk behandling.Tidligere studier har vist at 70 % av kliniske beslutninger avhenger av testresultatene.Når forskjellige deteksjonsmetoder brukes, er kravene til deteksjonsreagenssettene også forskjellige.
Figur 1
Figur 1:Diagram som viser nøkkelstadiene av generelle biomarkørnivåer i løpet av det typiske tidsforløpet av COVID-19-infeksjon.X-aksen angir antall dager med infeksjon, og Y-aksen angir virusmengden, konsentrasjonen av antigener og konsentrasjonen av antistoffer i ulike perioder.Antistoff refererer til IgM- og IgG-antistoffer.Både RT-PCR og antigendeteksjon brukes til å oppdage tilstedeværelse eller fravær av nytt koronavirus, som er direkte bevis for tidlig pasientdeteksjon.Innen en uke etter virusinfeksjon er PCR-deteksjon eller antigendeteksjon foretrukket.Etter den nye koronavirusinfeksjonen i ca. 7 dager har IgM-antistoffet mot det nye koronaviruset gradvis økt i pasientens blod, men varigheten av eksistensen er kort, og konsentrasjonen avtar raskt.I motsetning til dette dukker IgG-antistoffet mot viruset opp senere, vanligvis omtrent 14 dager etter virusinfeksjonen.IgG-konsentrasjonen øker gradvis, og den vedvarer en lang periode i blodet.Hvis IgM blir oppdaget i pasientens blod, betyr det at viruset nylig har blitt infisert, som er en tidlig infeksjonsmarkør.Når IgG-antistoffet påvises i pasientens blod, betyr det at virusinfeksjonen har vært det en stund.Det kalles også sen infeksjon eller tidligere infeksjon.Det ses ofte hos pasienter som er i restitusjonsfasen.
Biomarkørene til det nye koronaviruset
Det nye koronaviruset er et RNA-virus, som er sammensatt av proteiner og nukleinsyrer.Viruset invaderer vertens (menneskelige) kropp, går inn i celler gjennom bindingsstedets tilsvarende reseptor ACE2, og replikerer i vertsceller, noe som får det menneskelige immunsystemet til å reagere på fremmede inntrengere og produsere spesifikke antistoffer.Derfor kan nukleinsyrene og antigenene i hetteglasset og spesifikke antistoffer mot nytt koronavirus teoretisk brukes som spesifikke biomarkører for påvisning av det nye koronaviruset.For nukleinsyredeteksjon er RT-PCR-teknologi den mest brukte, mens serologiske metoder ofte brukes for påvisning av de nye koronavirusspesifikke antistoffene.For tiden er det en rekke testmetoder tilgjengelig som vi kan velge for å teste COVID-19-infeksjon [1].
Grunnleggende prinsipper for hovedtestmetoder for nytt koronavirus
Mange diagnostiske tester for COVID_19 er tilgjengelige så langt, med flere testsett som mottar godkjenning under en nødbruksautorisasjon hver dag.Selv om den nye testutviklingen kommer ut med så mange forskjellige navn og formater, er alle de nåværende COVID_19-testene i utgangspunktet avhengige av to hovedteknologier: nukleinsyredeteksjon for viralt RNA og serologiske immunanalyser som oppdager virusspesifikke antistoffer (IgM og IgG).
01. Nukleinsyredeteksjon
Omvendt transkripsjon-polymerasekjedereaksjon (RT-PCR), loop-mediert isotermisk amplifikasjon (LAMP) og neste generasjons sekvensering (NGS) er de vanlige nukleinsyremetodene for påvisning av nytt koronavirus-RNA.RT-PCR er den første typen test for COVID-19, anbefalt av både Verdens helseorganisasjon (WHO) og US Center for Disease Control and Prevention (CDC).
02.Serologisk antistoffpåvisning
Antistoff er et beskyttende protein som produseres i menneskekroppen som svar på virusinfeksjonen.IgM er en tidlig type antistoff, mens IgG er et senere type antistoff.Serum- eller plasmaprøven undersøkes vanligvis for tilstedeværelse av spesifikke IgM- og IgG-typer av antistoffet for vurdering av akutte og rekonvalesentative faser av COVID-19-infeksjon.Disse antistoffbaserte deteksjonsmetodene inkluderer kolloidalt gullimmunokromatografianalyse, lateks- eller fluorescerende mikrosfære-immunokromatografi, enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA) og kjemiluminescensanalyse.
03. Virusantigendeteksjon
Antigen er en struktur på viruset som gjenkjennes av menneskekroppen som utløser immunforsvaret til å produsere antistoffer for å fjerne viruset fra blod og vev.Et viralt antigen som er tilstede på viruset kan målrettes og oppdages ved å bruke immunoassay.I likhet med viralt RNA er virale antigener også tilstede i luftveiene til infiserte individer og kan brukes til å diagnostisere akuttfasen av COVID-19-infeksjonen.Derfor anbefales det ofte å samle prøver fra øvre luftveier som spytt, nasofaryngeale og orofaryngeale vattpinner, dyp hostesputum, bronkoalveolær skyllevæske (BALF) for innledende antigentesting.
Valg av testmetoder for nytt koronavirus
Å velge en testmetode involverer mange faktorer, inkludert kliniske omgivelser, testkvalitetskontroll, behandlingstid, testkostnader, prøvetakingsmetoder, tekniske krav til laboratoriepersonell, krav til anlegg og utstyr.Påvisningen av nukleinsyrer eller virale antigener er å gi direkte bevis på tilstedeværelsen av virusene og bekrefte diagnosen ny koronavirusinfeksjon.Selv om det er mange metoder for antigendeteksjon, er deteksjonssensitiviteten for det nye koronaviruset teoretisk lavere enn RT-PCR-amplifikasjonen.Antistofftesting er påvisning av antivirusantistoffer produsert i menneskekroppen, som henger i tid og ofte ikke kan brukes til tidlig påvisning i den akutte fasen av virusinfeksjon.Den kliniske settingen for deteksjonsapplikasjoner kan variere, og prøvesamlingsstedene kan også være forskjellige.For påvisning av virale nukleinsyrer og antigener, må prøven tas i luftveiene der viruset er tilstede, slik som nasofaryngeale vattpinner, orofaryngeale vattpinner, sputum eller bronkoalveolær skyllevæske (BALF).For antistoffbasert påvisning må blodprøver tas og undersøkes for tilstedeværelse av spesifikt antivirusantistoff (IgM/IgG).Imidlertid kan antistoff- og nukleinsyretestresultater utfylle hverandre.For eksempel, når testresultatet er nukleinsyrenegativt, IgM-negativt men IgG-positivt, indikerer disse resultatene at pasienten for øyeblikket ikke bærer viruset, men har blitt frisk fra den nye koronavirusinfeksjonen.[2]
Fordeler og ulemper med nye koronavirustester
I Diagnose and Treatment Protocol for Novel Coronavirus Pneumonia (Trial Version7) (utgitt av National Health Commission & State Administration of Traditional Chinese Medicine 3. mars 2020), er nukleinsyretesting brukt som gullstandardmetoden for diagnosen av romanen koronavirusinfeksjon, mens antistofftesting også anses som en av bekreftelsesmetodene for diagnosen.
Patogene og serologiske funn
(1) Patogene funn: Ny koronavirusnukleinsyre kan påvises i nasofaryngeale vattpinner, sputum, sekret i nedre luftveier, blod, avføring og andre prøver ved bruk av RT-PCR og/eller NGS-metoder.Det er mer nøyaktig hvis prøver tas fra nedre luftveier (sputum eller luftveisekstraksjon).Prøvene bør sendes inn for testing så snart som mulig etter innsamling.
(2) Serologiske funn: NCP-virusspesifikk IgM blir påviselig rundt 3-5 dager etter utbruddet;IgG når en titrering på minst 4 ganger økning under rekonvalesensen sammenlignet med den akutte fasen.
Valget av testmetoder avhenger imidlertid av geografiske steder, medisinske forskrifter og kliniske omgivelser.I USA utstedte NIH retningslinjer for behandling av Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) (side oppdatert: 21. april 2020) og FDA utstedte retningslinjer for diagnostiske tester for koronavirussykdom-2019 under folkehelsekrisen (utstedt 16. mars 2020 ), der serologisk testing av IgM/IgG-antistoffene kun er valgt som en screeningstest.
Metode for påvisning av nukleinsyre
RT_PCR er en svært sensitiv nukleinsyretest designet for å oppdage hvorvidt det nye koronavirus-RNA er tilstede i luftveiene eller andre prøver.Et positivt PCR-testresultat betyr tilstedeværelsen av nytt koronavirus-RNA i prøven for å bekrefte COVID-19-infeksjonen.Et negativt PCR-testresultat betyr ikke fravær av virusinfeksjonen fordi den kan bli påvirket av dårlig prøvekvalitet eller sykdomstidspunkt ved gjenopprettingsfasen osv.Selv om RT-PCR er en svært sensitiv test, har den flere ulemper.RT-PCR-tester kan være arbeidskrevende og tidkrevende, avgjørende avhengig av den høye kvaliteten på prøven.Dette kan være en utfordring fordi mengden av viralt RNA ikke bare varierer enormt mellom ulike pasienter, men også kan variere innen samme pasient avhengig av tidspunktet da prøven samles inn, så vel som infeksjonsfasene eller begynnelsen av kliniske symptomer.Å oppdage det nye koronaviruset krever prøver av høy kvalitet som inneholder en tilstrekkelig mengde intakt viralt RNA.
RT-PCR-testen kan gi et feil negativt resultat (falsk negativ) for noen pasienter som har COVID-19-infeksjon.Som vi vet, er de viktigste infeksjonsstedene til det nye koronaviruset lokalisert ved lungene og de nedre luftveiene, som alveoler og bronkier.Derfor anses sputumprøven fra en dyp hoste eller bronkoalveolar lavage fluid (BALF) å ha den høyeste følsomheten for virusdeteksjon.I klinisk praksis blir prøver imidlertid ofte samlet inn fra de øvre luftveiene ved bruk av nasofaryngeale eller orofaryngeale vattpinner.Å samle disse prøvene er ikke bare ubehagelig for pasienter, men krever også spesialutdannet personell.For å gjøre prøvetakingen mindre invasiv eller enklere, kan pasientene i noen tilfeller få en oral vattpinne og la dem ta en prøve fra munnslimhinnen eller tungeprøven selv.Uten tilstrekkelig viralt RNA kan RT-qPCR returnere et falskt negativt testresultat.I Hubei-provinsen, Kina, ble RT-PCR-sensitivitet i den første deteksjonen rapportert bare rundt 30%-50%, med et gjennomsnitt på 40%.Den høye frekvensen av falsk-negative var mest sannsynlig forårsaket av utilstrekkelig prøvetaking.
I tillegg krever RT-PCR-testen høyt trent personell for å utføre komplekse RNA-ekstraksjonstrinn og PCR-amplifikasjonsprosedyre.Det krever også et høyere nivå av biosikkerhetsbeskyttelse, spesiallaboratorieanlegg og sanntids PCR-instrument.I Kina må RT-PCR-testen for COVID-19-deteksjon utføres i biosikkerhetsnivå 2-laboratorier (BSL-2), med personellbeskyttelse ved bruk av biosikkerhetsnivå 3 (BSL-3) praksis.Under disse kravene, fra begynnelsen av januar til begynnelsen av februar 2020, var kapasiteten til Kina Wuhans CDC-laboratorium bare i stand til å oppdage noen få hundre tilfeller per dag.Normalt vil ikke dette være et problem ved testing av andre smittsomme sykdommer.Men når man håndterer en global pandemi som COVID-19 med potensielt millioner av mennesker som skal testes, blir RT-PCR et kritisk problem på grunn av kravene til spesielle laboratoriefasiliteter eller teknisk utstyr.Disse ulempene kan begrense at RT-PCR brukes som et effektivt verktøy for screening, og kan også føre til forsinkelser i rapportene om testresultater.
Serologisk antistoffdeteksjonsmetode
Med utviklingen av sykdomsforløpet, spesielt i mellom- og sene stadier, er antistoffdeteksjonshastigheten veldig høy.En studie ved Wuhan Central South Hospital viste at antistoffdeteksjonsraten kunne nå mer enn 90 % i den tredje uken med COVID-19-infeksjon.Antistoffet er også produktet av den menneskelige immunresponsen mot det nye koronaviruset.Antistofftesten gir flere fordeler fremfor RT-PCR.For det første tester det serologiske antistoffet enkelt og raskt.Antistoff lateral flow tester kan brukes for punkt-of-care for å levere et resultat på 15 minutter.For det andre er målet påvist av den serologiske testen antistoffet, som er kjent for å være mye mer stabilt enn viralt RNA.Under innsamling, transport, lagring og testing er prøvene for antistofftester generelt mer stabile enn prøvene for RT-PCR.For det tredje, fordi antistoffet er jevnt fordelt i blodsirkulasjonen, er det mindre prøvetakingsvariasjon sammenlignet med nukleinsyretesten.Prøvevolumet som kreves for antistofftesten er relativt lite.For eksempel er 10 mikroliter fingerstikkblod tilstrekkelig for bruk i antistoff lateral flow test.
Generelt er antistofftesten valgt som et supplementsverktøy for nukleinsyredeteksjon for å forbedre deteksjonshastigheten av det nye koronaviruset under sykdomsforløpene.Når antistofftesten brukes sammen med en nukleinsyretest, kan den øke analysenøyaktigheten for diagnosen COVID19 ved å redusere potensielle falsk-positive og falsk-negative resultater.Den gjeldende driftsveiledningen anbefaler ikke å bruke to typer tester separat som et uavhengig deteksjonsformat, men bør brukes som et kombinert format.[2]
Figur 2:Riktig tolkning av nukleinsyre- og antistofftestresultater for påvisning av ny koronavirusinfeksjon
Figur 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – Nytt coronavirus IgM/IgG antistoff dobbelt hurtigtestsett (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG antistoff hurtigtest, lateksimmunokromatografi)
Figur 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR kit (deteksjon for tre gener, fluorescerende probemetode).
Merk:Dette svært følsomme, bruksklare PCR-settet er tilgjengelig i lyofilisert format (frysetørkeprosess) for langtidslagring.Settet kan transporteres og oppbevares i romtemperatur og er holdbart i ett år.Hvert rør med forblanding inneholder alle reagensene som trengs for PCR-amplifikasjonen, inkludert revers-transkriptase, Taq-polymerase, primere, prober og dNTPs-substrater. Brukere kan ganske enkelt rekonstituere blandingen ved å tilsette PCR-grad vann sammen med malen og deretter laste på et PCR-instrument for å kjøre amplifikasjonen.
Som svar på det nye koronavirusutbruddet, har Liming Bio-Products Co., Ltd. jobbet raskt for å utvikle to diagnosesett for å gjøre det mulig for kliniske og offentlige helselaboratorier å raskt diagnostisere COVID-19-infeksjon.Disse settene er svært egnet for bruk for storskala screening i land og regioner der det nye koronavirusutbruddet sprer seg raskt, og for å gi diagnose og bekreftelse for COVID-19-infeksjon.Disse settene er kun til bruk under Pre-notified Emergency Use Authorization (PEUA).Testing er begrenset til laboratorier som er sertifisert i henhold til forskriftene til nasjonale eller lokale myndigheter.
Antigendeteksjonsmetode
1. Viral antigendeteksjon er klassifisert i samme kategori for direkte deteksjon som nukleinsyredeteksjon.Disse direkte deteksjonsmetodene ser etter bevis på virale patogener i prøven og kan brukes for bekreftelsesdiagnose.Utviklingen av antigendeteksjonssett krever imidlertid høykvalitets monoklonale antistoffer med sterk affinitet og høy sensitivitet som er i stand til å gjenkjenne og fange opp patogene virus.Det tar vanligvis mer enn seks måneder å velge og optimalisere et monoklonalt antistoff som er egnet for bruk i forberedelsen av antigendeteksjonssettet.
2. For øyeblikket er reagensene for direkte påvisning av det nye koronaviruset fortsatt under forsknings- og utviklingsstadium.Derfor har ingen antigendeteksjonssett blitt klinisk validert og kommersielt tilgjengelig.Selv om det tidligere ble rapportert at et diagnostikkfirma i Shenzhen har utviklet et antigendeteksjonssett og klinisk testet i Spania, kunne ikke analysens pålitelighet og nøyaktighet valideres på grunn av tilstedeværelsen av reagenskvalitetsproblemer.Til dags dato har ikke NMPA (tidligere Kina FDA) godkjent noe antigendeteksjonssett for klinisk bruk ennå.Avslutningsvis er det utviklet en rekke deteksjonsmetoder.Hver metode har sine fordeler og begrensninger.Resultatene fra ulike metoder kan brukes til verifikasjon og komplementering.
3. Å produsere et COVID-19-testsett av høy kvalitet avhenger sterkt av optimalisering under forskning og utvikling.Liming Bio-Product Co.,Ltd.testsett er pålagt å oppfylle strenge produksjons- og kvalitetskontrollstandarder for å sikre at de gir de høyeste nivåene av ytelse og konsistens.Forskerne ved Liming Bio-Product Co., Ltd. har over tjue års erfaring med å designe, teste og optimalisere in vitro diagnostiske sett for å sikre det høyeste ytelsesnivået innen analytisk kvantifisering.
Under COVID-19-pandemien møtte den kinesiske regjeringen en økning av den enorme etterspørselen etter epidemiforebyggende materialer i de internasjonale hotspots.5. april, på pressekonferansen til statsrådets felles forebyggings- og kontrollmekanisme "Styrking av kvalitetsstyringen av medisinske materialer og regulering av markedsordenen", Jiang Fan, en førstenivåinspektør for utenrikshandelsavdelingen i departementet. of Commerce, sa: "Deretter vil vi fokusere vår innsats på to aspekter, for det første å øke hastigheten på støtten til flere medisinske forsyninger som trengs av det internasjonale samfunnet, og også å forbedre kvalitetskontroll, regulering og styring av produktene. Vi vil gi Kinas bidrag til i fellesskap å svare på den globale epidemien og bygge et fellesskap med en felles fremtid for menneskeheten.
Figur 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.s nye koronavirusreagens har oppnådd EUs CE-registreringssertifikat
Hedersbeviset
Houshenshan
Figur 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. støttet Wuhan Vulcan(HouShenShan) Mountain Hospital for å kjempe mot COVID-19-epidemien og ble tildelt æresbeviset til Wuhan Røde Kors.Wuhan Vulcan fjellsykehus er det mest kjente sykehuset i Kina som spesialiserer seg på behandling av alvorlige COVID-19-pasienter.
Ettersom det nye koronavirusutbruddet fortsetter å spre seg over hele verden, trapper Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. opp for å støtte og hjelpe lokalsamfunn over hele verden med våre innovative teknologier for å bekjempe denne enestående globale trusselen.Rask testing av COVID-19-infeksjon er en kritisk del av å håndtere denne trusselen.Vi fortsetter å bidra på en betydelig måte ved å tilby diagnostiske plattformer av høy kvalitet i hendene på helsepersonell i frontlinjen slik at folk kan motta de kritiske testresultatene de trenger.Liming Bio-products Co., Ltd.s innsats i kampen mot COVID-19-pandemien er å bidra med våre teknologier, erfaringer og ekspertise til internasjonale samfunn for å bygge et globalt skjebnefellesskap.
Langt trykk~Skann og følg oss
E-post: sales@limingbio.com
Nettsted: https://limingbio.com
Innleggstid: mai-01-2020
